本制品是由miRNA反转录及miRNA定量两部分试剂组成。反转录部分的反转录酶M-MLV纯化自含有莫洛尼氏鼠白血病病毒逆转录酶,对该酶进行修饰的新型反转录酶,酶活性高,反转录效率更快。具有较弱的RNAseH 活性和较高的热稳定性,可在37℃-60℃之间以miRNA Adaptor Primer为引物合成miRNA的cDNA。
定量部分中的2×SG Green miRNA qPCR Mix是采用SYBR? Green I嵌合荧光法进行miRNA 实时荧光定量PCR的专用预混试剂。制品中含有real-time qRT-PCR反应的最适浓度SYBR? Green I及****的反应缓冲体系包含PCR反应的通用miRNA Rprimer。进行实验时,在反应体系中加入模板和正向引物(即miRNA本身序列或有部分修饰碱基)即可,配制十分方便简单。荧光染料SYBR? Green I仅与双链DNA结合后发出荧光,通过检测反应体系中的SYBR? Green I荧光强度,达到实时检测PCR产物扩增量的目的,可以对目的miRNA进行准确定量。