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植物miRNA过表达/抑制表达载体构建
   MicroRNA (miRNA) 是一类由内源基因编码的长度约为22 个核苷酸的非编码单链RNA分子,它们在动植物中参与转录后基因表达调控。miRNA的抑制或过表达对于研究基因功能有重要的意义。
miRNA抑制表达载体构建
   目前,主要采用两种手段达到抑制目的RNA表达或活性的要求,此两种技术已经在动植物得到应用。 
   1. 化学合成的miRNA inhibitor,用于下调目的细胞中的miRNA ,以实现loss-of function研究。
   2. 利用miRNA target mimicry 技术,设计目标可结合miRNA而无法被miRNA及RISC切割的target mimicry 人工核酸载体,抑制目标miRNA的活性,造成miRNA抑制的效果。
miRNA过表达载体构建
  • 过表达miRNA
      atmiRNA,或过表达天然pri-miRNA,根据需求选择启动子及筛选标记。
参考文献
  Tang G, Yan J, Gu Y, Qiao M, Fan R, Mao Y, Tang X. (2012) Construction of short tandem target mimic (STTM) to block the functions of plant and animal microRNAs. Methods 58(2):118-25.

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